La
Técnica de la Columna Seca
Cierra
el hueco entre cromatografía de columna
preparativa y cromatografía de capa
delgada analítica.
Cromatografía de
Columna Seca
Este es
un método único y simple para purificar
material. Es barato y rápido. Es una
técnica de columna sencilla de
extracción.
Debajo
es un esquema del método.
DCC: El Procedimiento
Procedimientos Simplificados
1.
Use el mismo sistema de solvente que ha
sido desarrollado en un plato de TLC.
2.
Corte el tubo de nylon al largo deseado.
Nota
especial: para aislar 1 gramo de
material use aproximadamente 300 gramos
de solvente en un tubo de 1 metro x 40
mm.
Preparación
3.
Cierre el tubo enrollando la punta y
asegurándolo con un sello/clip/engrampa.
4.
Inserte una almohadilla o bolita de lana
de vidrio al fondo de la columna;
penetre agujeritos al fondo con una
aguja.
5.
Llene al seco la columna a ¾ del largo.
Llenando
la Columna
6. La
muestra lista para ser separada debe ser
llenada con por lo menos 10 veces su
peso del mismo solvente en un tubo de
ensayo cónico.
7.
Añada un centímetro adicional de
solvente encima de la muestra seguida
por una pequeña almohadilla de lana de
vidrio o un centímetro de solvente
puesto encima con mucho cuidado.
Aplicando la Muestra
8. Se
asegura el tubo a una grapa en una base.
9. Se
abre la llave de paso de la reserva de
solvente y añade el solvente hasta que
llegue hasta el fondo de la columna.
Después se para. El tiempo transcurrido
es aproximadamente 30 minutos.
10.
Encuentre la posición de las bandas
separadas con luz ultravioleta, UV
quenching. Alternativamente, corte un
pedazo de 1/6” del tubo. Espraye el área
expuesta con un reactivo visualizante y
aliñe con la columna que no ha sido
tratada para identificar (marcar) las
bandas separadas.
11.
Marque la posición de las bandas en el
tubo de nylon.
12.
Remueva la columna de la grapa.
13.
Corte la columna en secciones deseadas.
14.
Eluya los compuestos puros de las
secciones tajadas con solventes polares.
Añadiendo
el Solvente Apropiado
Recuperación de la
Muestra
Referencias:
B. Love
and K.M. Zinder, Chem Ind. (London)
1965, 15
B. Love and M.M. Goodman Chem. Ind.
(London) 1967, 2026
Tubería de Aluminio de
Nylon para DCC
DCC es
bien simple y económico porque la
tubería de nylon es llenada del solvente
(otros tipos de columnas como las de
vidrio, etc. pueden ser usadas) Este
tubo es doblado y en rollos. Son fáciles
de remover las arrugas que pueden formar
con soplando una corriente de aire
caliente por el tubo. Sacudiendo la
tubería en acetona antes de hacer el
tratamiento del aire caliente facilita
la “planchada” del tubo de nylon.
La información en esta
pagina tiene derechos de autor ©
Septiembre, 1984, M. L. Moskovitz
Cromatografía de Columna Seca Comparada
a TLC